Самостоятельная работа студентов на занятии

1 Определение ФОП в воде.

2 Определение ФОП в биоматериале методом хроматографии в тонком слое.

3 Рассмотрение судебного дела.

МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФОП В ВОДЕ

Гидроперекисная реакция (реакция Шанемана)

Реакция основана на способности ФОП увеличивать скорость окисления бензидина и других окислительно-восстановительных индикаторов. Механизм этой реакции сводится к тому, что при действии перекиси водорода на ФОП образуется гидроперекись этого соединения, а в щелочной среде (обеспечивается наличием натрия цитрата) происходит окисление бензидина, что проявляется появлением желто-оранжевого окрашивания.

В пробирку к 5 мл исследуемой воды добавляют 0,5 мл 0,2% водно-спиртового раствора бензидина гидрохлорида, 0,5 мл 2% раствора перекиси водорода и после тщательного перемешивания вносят 1 мл 10% раствора натрия цитрата. Пробирку помещают в водяную баню при температуре плюс 75-80 С на 5 минут. Окрашивание содержимого пробирки в желтоватый или желтовато-оранжевый цвет указывает на присутствие ФОП.

Одновременно проводят контрольное определение.

Чувствительность реакции - 10-100 мг в 1 литре.

Реактивы:

- 0,2% водно-спиртовой раствор бензидина гидрохлорида;

- 2% раствор перекиси водорода;

- 10% раствор натрия цитрата;

МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФОП МЕТОДОМ ХРОМАТОГРАФИИ

В ТОНКОМ СЛОЕ

ФОП из органов и тканей экстрагируют хлороформом. Экстракт очищают путем перераспределения пестицидов в воде, а затем - в хлороформе.

Концентрированные экстракты хроматографируют в тонком слое силикагеля. В качестве подвижной фазы используют н-гексан - ацетон в соотношении 1:1.

Проявление ФОС проводят смесью резорцина с карбонатом натрия и последующей обработкой раствором щелочи.

Пестициды проявляются в виде малиновых пятен на белом фоне пластинки. Количественное определение препаратов проводят путем визуального сравнения интенсивности окраски и размера пятен проб с пятнами стандартных растворов ФОС.

Чувствительность метода - 0,5 мг/кг.

Реактивы: хлороформ х.ч., ацетон х.ч., н-гексан, натрия или калия гидроокись, хлорофос, ДДВФ-60%, резорцин, натрия карбонат, пластинки «силуфол».

Проявители:

- 2% водный раствор резорцина и 10% раствор натрия карбоната. Растворы смешивают перед опрыскиванием в соотношении 2:3;

- 5% раствор натрия или калия гидроокиси.

Ход определения:

Исследуемую пробу материала весом 20 г измельчают, помещают в коническую колбу, заливают 40 мл хлороформа на ночь. Экстракт отделяют фильтрованием через бумагу в фарфоровую выпарительную чашку и концентрируют выпариванием досуха на водяной бане при температуре не выше 40⁰С. Для извлечения хлорофоса и ДДВФ из сухого остатка экстрагирование проводят дистиллированной водой трижды порциями по 5мл, тщательно растирая остаток стеклянной палочкой. Экстракты собирают через бумажный фильтр и делительную воронку, объединяют и для извлечения пестицидов из водного раствора проводят экстрагирование хлороформом дважды порциями по 15 мл, встряхивая в течение минуты. Хлороформные экстракты сливают в фарфоровую выпарительную чашку через бумажный фильтр, заполненный безводным натрия сульфатом, предварительно промытым хлороформом. Экстракты объединяют и выпаривают досуха без нагрева в вытяжном шкафу.

Сухой остаток растворяют в 0,2 мл хлороформа, который с помощью шприца наносят на пластинку «силуфол» со слоем сорбента. Эту процедуру выполняют трижды.

Для идентификации пестицидов и их количественного определения на ту же пластинку на расстоянии 1,5 - 2 см друг от друга наносят стандартные растворы хлорофоса и ДДВФ, содержащие от 5 до 20 мкг действующего вещества. Пластинку помещают в хроматографическую камеру под углом 45 градусов с подвижной системой растворителей гексан-ацетон в соотношениии 1:1. Камеру предварительно выдерживают в закрытом состоянии с подвижной фазой в течение часа. После подъема фронта подвижной фазы на 10 см от линии старта, пластинку вынимают и сушат при комнатной температуре в вытяжном шкафу до испарения растворителей.

Для проявления хроматограмм пластинку опрыскивают до насыщения слоя сорбента смесью 2% раствора резорцина и 10% раствора натрия карбоната в соотношении 2:3 соответственно и помещают в сушильный шкаф на 5-8 минут при температуре 100⁰С.

На белом фоне пластинки хлорофос и ДДВФ проявляятся в виде слабозаметных пятен малинового цвета. После охлаждения пластинку опрыскивают до насыщения 5% раствором натрия или калия гидроокиси и опять помещают в сушильный шкаф. Через 2-3 минуты интенсивность окраски ДДВФ усиливается.

Количественное определение пестицидов проводят путем визуального сравнения интенсивности малиновой окраски пятен пробы и их величины с пятнами стандартных растворов.

Содержание пестицидов в мг/кг (Х) рассчитывают по формуле:

где:

А - количество пестицида, найденное в пробе путем сравнения со стандартом, мкг;

В - вес исследуемой пробы, г.

ЗАНЯТИЕ 13

Тема: «Отравление животных карбаматами, пиретроидами и зооцидами»

ВОПРОСЫ ПО ТЕМЕ

1 Общая характеристика и классификация карбаматов.

2 Отравление пропоксуром.

3 Отравление ТМТД.

4 Отравление гербицидами, производными карбаминовых кислот.

5 Отравление животных пиретроидами.

6 Отравление животных зооцидами - антикоагулянтами.

7 Отравление животных цинка фосфидом.

8 Отравление животных крысидом и вакором.

ДОМАШНЕЕ ЗАДАНИЕ

Выписать:

1 Кошке комплекс лекарственных средств при отравлении байгоном (пропоксуром).

2 Овце комплекс лекарственных средств при отравлении ТМТД.

3 Свинье комплекс лекарственных средств при отравлении пиретроидами.

4 Свинье комплекс лекарственных средств при отравлении цинка фосфидом.

5 Теленку антидот при отравлении бария карбонатом.

6 Лошади комплекс лекарственных средств при отравлении ракумином.